动物组织、细胞、细菌总蛋白提取试剂盒
(Total Protein Extraction Kit for Animal Tissues, Cells and Bacteria)
产品目录号:PP 001,002, 003
规格:50,100,200T
产品内容
产品介绍
本产品温和有效,适用于动物组织,细胞和细菌的总蛋白提取, 5-10min内即可完成样品处理,提取的蛋白质可兼容大多数蛋白质分析实验
及常规的下游应用。相较于市面上其他同类或自制配方的总蛋白提取试剂盒,本品可提供更高的蛋白得率。
储存条件
Wash-buffer,Loading buffer置于室温(15-25℃),干燥条件 下,可保存 12 个月,更长时间的保存可置于 2-8℃。
2-8℃保存条件下,若溶液产生沉淀,使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间,必要时可在 37℃水浴中预热 10min,
以溶解沉淀。 Pro-lysis buffer1,蛋白酶抑制剂置于-20℃保存。
注意事项
首次使用时请仔细阅读注意事项。
1. 第一次使用前应按标签需要添加格外成分。
2. 样品应避免反复冻融,否则会导致提取过程产生不可预计后果。
3. 观察各种试剂中是否有析出或沉淀,若有,可以室温放置半小时后摇匀使用。
总蛋白提取操作步骤
1. 称取适量样品:(良好保持的动物组织2-10mg/培养细胞 0.1-10 ×107个/OD 0.6的革兰氏阴性菌 0.1-1ml菌体沉淀)转入 1.5ml 离心管中。
2. (可选步骤)向离心管中加入 1000μ l washBuffer1,移液器吹打 混匀,采用 12,000rpm(~13,400 × g )离心 1min;弃上清。
3. 向沉淀中加入 0.5 mlPro-lysis buffer1,随后加入 50ul蛋白酶抑制剂,随后使用 SoniConvert组织消融仪进行消融 3-9s,不能消融的组织残渣可以通过 40 μ m滤网过滤,也可以 1,000g ,4℃ 离心 1min,取上清液备用。
*注意:根据组织类型选择预设模式,也可以采用 70%强度,工作 3-9 秒,直至组织块基本消失。
4. 蛋白浓度及纯度检测,取 100ul上清于 EP 管中,加入 20ulLoading Buffer,轻柔混匀后,于 100℃水浴或者金属浴上孵育 15min。瞬时离心(12000g,10s)收集液体.
5. SDS-PAGE 上样检测。